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illumina 病毒基因測序v3試劑盒 600次

簡要描述:產(chǎn)品名稱:illumina 病毒基因測序v3試劑盒 600次

產(chǎn)品貨號:MS-102-3003

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  • 產(chǎn)品型號:MS-102-3003
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-07-28
  • 訪  問  量:1325
詳細介紹
品牌illumina/美國因美納貨號MS-102-3003
供貨周期現(xiàn)貨應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品名稱:MiSeq Reagent Kit v3 (600 cycles)基因測序試劑盒

產(chǎn)品貨號:MS-102-3003

產(chǎn)品規(guī)格:

大輸出: 15 Gb(600個循環(huán)數(shù)),3.8 Gb(150個循環(huán)數(shù))


大Read: 多達2501萬


核酸類型: RNA, DNA


試劑類型: 雙端測序, 簇生成, 邊合成邊測序


技術: 測序


系統(tǒng)兼容性:研究模式下的MiSeqDx, 研究模式下的MiSeq FGx, MiSeq, MiSeq

產(chǎn)品介紹:

MiSeq試劑盒v3的通量在所有MiSeq試劑盒中居*。這款v3試劑盒保留了與v1和v2試劑盒相同的即用型預裝試劑盒,通過改良試劑,可提高簇密度和片段長度,并提高質(zhì)量(Q)分值。


借助MiSeq試劑盒v3,研究人員可:


• 使單次運行的輸出翻倍


• 使用600次循環(huán)試劑盒,使片段長度長延伸至2 x 300堿基對


• 將片段數(shù)量增至2500萬個,以開創(chuàng)新的應用


更新系統(tǒng)軟件后,可釋放v3試劑盒的全部功能


MiSeq v3試劑盒可使每個流動槽的輸出量翻倍。該試劑盒以600次循環(huán)格式提供,在任何Illumina測序系統(tǒng)上均可生成長片段長度。該試劑盒還提供150次循環(huán)格式,該格式支持計數(shù)應用。此外,我們將繼續(xù)供應所有MiSeq試劑盒v2配置。MiSeq試劑組件采用RFID編碼,并可巧妙地與MiSeq系統(tǒng)交互,以驗證與用戶定義的應用之間的兼容性。


產(chǎn)品名稱:illumina 病毒基因測序v3試劑盒 600次        產(chǎn)品貨號:MS-102-3003

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熱賣產(chǎn)品:

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產(chǎn)品名稱:MiSeq Reagent Kit v3 (600 cycles)基因測序試劑盒

產(chǎn)品貨號:MS-102-3003

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Illumina二代測序技術,邊合成邊測序(SBS),是廣泛采用的新一代測序(NGS)技術,負責產(chǎn)生世界上90%以上的測序數(shù)據(jù)。

Illumina的二代測序技術稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號收集、剪切等3個步驟。這3個步驟可以重復,循環(huán)進行。每循環(huán)一次測定一個堿基。想測定多少個堿基(即讀長),就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設定。到底測序多長合適,要根據(jù)項目性質(zhì)和需求來決定。大多數(shù)情況下,SR實驗(單端測序)測定1x50個堿基,PE實驗(雙端測序)測定2x150個堿基。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP級具特色,它們同時具有兩個修飾基團:一個熒光基團,一個可逆終止基團。A、G、C、T 4種堿基分別標記4種不同的熒光基團,它們在不同波長的激光激發(fā)下,能夠發(fā)射不同波長(即顏色)的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應,因此根據(jù)激發(fā)光的波長可以識別堿基。4種堿基的終止基團是一樣的。由于終止基團的存在,所有dNTP每次都只能延伸1個堿基,無論給予多長的反應時間。又由于該終止基團是可逆的,在熒光信號收集完畢之后,可以用剪切劑切除該終止基團,使堿基恢復自然的可延伸狀態(tài),這時即可繼續(xù)進行下一輪循環(huán),再測定一個堿基。

可逆終止基團技術是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術一起,構成了Illumina二代測序的兩大支柱,為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)打下了堅實的基礎。

2 信號采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管,兩個濾色片。它們兩兩組合,可以形成4種不同的激發(fā)波長,正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標記的熒光基團在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號,可以用相機拍攝或者掃描的方式收集信號。掃描技術速度比較快,被X10系列采用。由于FC面積比較大,而且上表面和下表面要分別拍照,所以拍照過程相當耗時。對于經(jīng)典的HiSeq 2000來說,一次測序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號,需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢,時間比測序反應本身還要長。

3 剪切

熒光信號收集完畢后,關閉激光,用剪切劑去除測序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標記的熒光基團和終止基團。兩個修飾基團均被切除,一方面消去干擾熒光,一方面使鏈末端的堿基回復到自然的可延伸狀態(tài),為下一輪測序做好準備。

再重復合成、激發(fā)、收集等步驟,即可進行第二個堿基的測序。

測序循環(huán)可以重復多次。理論上可以一直重復,直到信噪比降低得無法有效識別堿基信號為止。由于熒光基團的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減,Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減,所以實際上測序循環(huán)次數(shù)是有限的,大重復次數(shù)與sbs試劑的配方有關。測序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設置過程中人為,這個重復次數(shù)就是每個測序片段的讀長。目前,Illumina平臺的讀長有2x100 bp,2x125 bp,2x150 bp,2x300 bp等多種,其中2x150 bp用得zui廣泛。


單端測序:單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進行片段化處理形成200-500bp的片段,引物序列連接到DNA片段的一端,然后末端加上接頭,將片段固定在flow cell上生成DNA簇,上機測序單端讀取序列。

雙端測序:雙端測序(Paired-end)方法是指在構建待測DNA文庫時在兩端的接頭上都加上測序引物結合位點,在di一輪測序完成后,去除di一輪測序的模板鏈,用對讀測序模塊(Paired-End Module)引導互補鏈在原位置再生和擴增,以達到第二輪測序所用的模板量,進行第二輪互補鏈的合成測序。



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