一起來(lái)了解一下免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法吧

更新時(shí)間：2020-04-15瀏覽：1865次

　　免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞(細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞)的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。

　　免疫細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基使用方法

　　1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個(gè)核細(xì)胞。

　　2、單個(gè)核細(xì)胞的接種與誘導(dǎo)活化

　　1) 0d時(shí)，繃胞計(jì)數(shù)。按細(xì)胞密度2x106cell/mL接種至對(duì)應(yīng)體積的培養(yǎng)液中。添加誘導(dǎo)因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

　　2) 1d時(shí)(24小時(shí))，添加誘導(dǎo)因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細(xì)胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。

　　3、細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴(kuò)增

　　1) 3d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時(shí)添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補(bǔ)液比例大致在1：2左右(原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積)

　　2) 5d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：3左右。

　　3) 7d時(shí)，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(06-08)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：2左右。

　　4) 9d時(shí)，將剩余培養(yǎng)液全部加入。

　　主要特點(diǎn)

　　1、無(wú)血清、不含異源動(dòng)物成分;所有成分都是明確的，且同種來(lái)源(人)，包括蛋白質(zhì);不含抗生素;

　　2、能夠培養(yǎng)人淋巴細(xì)胞、CIK、DC、NK等各類免疫細(xì)胞;

　　3、具有很高的成活率和擴(kuò)增倍數(shù);

　　4、能夠維持高密度培養(yǎng);

　　5、具有很高的殺傷活性。

　　注意事項(xiàng)

　　1、如果觀察培養(yǎng)基種有可見(jiàn)的沉淀物，不能再使用;

　　2、超過(guò)標(biāo)簽上的截止使用日期，不得再使用;