01 臨床背景與挑戰(zhàn)

HER2信號通路異常激活驅(qū)動乳腺癌進(jìn)展，其表達(dá)水平直接影響靶向治療方案。隨著抗體-藥物偶聯(lián)物Trastuzumab deruxtecan（T-DXd）獲FDA批準(zhǔn)用于HER2低表達(dá)乳腺癌（IHC 1+/2+且ISH陰性），傳統(tǒng)免疫組化（IHC）的局限性日益凸顯：

• 病理醫(yī)師對IHC 0與1+評分的一致性僅26%

• 半定量分析難以捕捉HER2表達(dá)的連續(xù)譜系

• 主觀判讀影響T-DXd受益人群篩選

02 創(chuàng)新研究方法

Emory大學(xué)Li Xiaoxian團(tuán)隊采用多平臺對比方案：

樣本庫構(gòu)建

• 526例TMA樣本（含243例患者組織芯）

• 32例轉(zhuǎn)移灶活檢（來自23例接受T-DXd治療患者）

核心技術(shù)對比

• RNAscope檢測

FFPE樣本經(jīng)自動化探針雜交，QuPath軟件量化腫瘤細(xì)胞平均HER2 mRNA拷貝數(shù)

• 雙平臺IHC驗證

Ventana PATHWAY與Dako HercepTest按ASCO/CAP標(biāo)準(zhǔn)評分（0/UL/1+/2+/3+）

• AQUA™蛋白定量

免疫熒光法精確定量HER2蛋白表達(dá)（檢測限≥3 amol/mm2）

03 關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)相關(guān)性分析

檢測指標(biāo)                                    相關(guān)系數(shù) (r)                    P值

RNAscope vs 蛋白水平     0.944                       <0.0001

RNAscope vs IHC H-score          0.755-0.761                <0.0001

IHC診斷盲區(qū)驗證

• IHC無法區(qū)分0/UL/1+組的蛋白水平差異（p>0.05）

• RNAscope定量顯示IHC同組別間mRNA表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異

治療反應(yīng)預(yù)測效能

分組                                 RNAscope定量 (點/細(xì)胞)                         T-DXd反應(yīng)率

應(yīng)答者 (n=12)                      6.4±8.2                                                        83%

無應(yīng)答者 (n=20)                 2.6±2.2                                                        20%

傳統(tǒng)IHC的局限性

• 染色強度判讀受抗體批次/操作流程影響

• 無法量化HER2低表達(dá)連續(xù)譜系

RNAscope技術(shù)優(yōu)勢

• 全流程自動化降低人為誤差

• 數(shù)字化輸出提供客觀判讀標(biāo)準(zhǔn)

• 精準(zhǔn)識別T-DXd潛在受益人群

注：文章內(nèi)容來源于網(wǎng)絡(luò)